实验材料 细胞和组织 试剂、试剂盒 氯仿 氯化铯溶液 二硫苏糖醇 EDTA 乙醇 异硫氰酸胍裂解缓冲液 异丙醇 N-月桂酰肌氨酸 氯化锂 液氮 β-巯基乙醇 苯酚 仪器、耗材 离心机和转子 研钵和杵 超速离心管 实验步骤 ......
动物组织基因组DNA提取试剂盒一、简介动物组织基因组DNA提取试剂盒(DePure Tissue DNA Kit)适用于动物组织、培养细胞、抗凝血液、体液、分泌液等生物样品的DNA提取。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，整个提取过程只需30分
CDNA文库筛选（一）λgt11 cDNA文库铺平板宿主细菌制备1．用一个i宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基（Y1088用于噬菌斑杂交，Y1090用于免疫筛选），于37℃振荡培养过夜。2．将过夜培养物以3000×g离心5min。3．分别用2ml λ-dil（10 mmol/L
在做Northern等杂交实验、构建cDNA文库、获取能够编码真核生物蛋白的基因、获得RNA病毒基因时，会用到RNA提取和RT-PCR技术。 真核生物的基因组是DNA，为什么不直接从DNA PCR得到我们需要的基因呢？因为真核生物的基因含有大量的非编码区，称为内元（intron），线
第一部分RNA 提取策略1、RNA降解的原因内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因，因为人体细胞自身就是几十分钟（20min？）mRNA被降解一轮，所以不管是组织还是细胞还是液体状样本在离开其中细胞的最佳生活状态后都应该尽快的被妥善的方法保存起来。外源性RNA酶也是一个需要注意的因素，最常见
离心技术的类型最大速度方法 (1)移动界面超速离心法 含几个组分的样品在足够高的离心场中离心时，每种颗粒都达到其最大沉降速度，这时样品开始分离。离心管的上层逐渐形成透明的上清液，并形成对应于样品各组分的一系列浓度界面，界面的移动相对于每种组分来说是特征的。虽然利用这种方法不一定能实现组分的纯化分离，
质粒DNA的提取与纯化质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1 kb至200 kb以上不等。通常情况下，质粒可持续稳定地处于染色体外的游离状态，具有自主复制功能；但在一定条件下也会可逆地整合到宿主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。 质粒已成为核酸克隆和测序最常用的载体。质
大家在分析一些水质时都知道结果往往会受到很多因素的影响。因此分析人员想要提高分析结果的准确性，就必须详细掌握操作中需要注意的问题，在实验中避免发生干扰。上一节我们介绍了分析钠离子的方法，今天我们要讲解的是分析时一些需要注意的问题。分析钠离子时要注意的问题1.钠离子在空气-乙炔火焰中会出现电离的现象
分离亚细胞组分的第一步是制备组织匀浆或细胞匀浆。匀浆（Homogenization）是在低温条件下，将组织或细胞放在匀浆器中加入等渗匀浆介质（即0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液）研磨，使细胞被机械地研碎成为各种亚细胞组分和包含物的混合物。分离亚细胞组分的第一步是分级分离。它通过
降水中钾、钢离子的浓度为零至几个毫克/升。测定方法中,空气乙炔贫焰原子吸收法灵敏度较高,而火焰光度法灵敏度较低。经个实验室验证,用原子吸收分光光度法测定K+为1.00mg/L、Na+为1.20mg/L,并含有Ca2+5.00mg/L、Mg2+0.401mg/L、Cl-2.76mg/L的合成水样,测定
上回介绍了常见的手工法核酸提取试剂成分及原理。今天就给大家介绍一下时下最流行的磁珠法提取试剂的成分及原理吧。磁珠法提取试剂常见成分SDS（十二烷基硫酸钠)——性质:1、阴离子表面活性剂：对人体微毒；2、优异的发泡剂：广泛用于洗衣粉、牙膏、洗发水、灭火器； 3、易溶于热水：当水温高于8℃（≈）时，
1．RNA的提取RNA的提取其实原理很简单：通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃。1．1 分离高质量RNA成功的cDNA合成来自高质量的RNA
现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解，并且导至了免疫新策略的产生，免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文盘点了与免疫学有关的分子生物学实验技术汇总。一、GST pull-down实验GST是指谷胱甘肽巯基转移酶，GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交
植物RNA提取可应用于：（1）进行植物分子生物学方面的研究；（2）进行Northern杂交分析、纯化mRNA以用于体外翻译或cNDA文库构建等研究。实验方法原理通过裂解液β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后用乙醇调节结合条件
1．RNA的提取RNA的提取其实原理很简单：通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃。1．1 分离高质量RNA成功的cDNA合成来自高质量的RNA
为确保人身安全,实验室专用离心机必须由专业人员操作,操作前请详细阅读使用说明书。 用户使用的电源必须有可靠的接地，以确保安全。确保试样等重配平、对称均匀放置。严禁在不平衡状态下进行运转。旋转盘凹槽应可靠地安装在回转轴轴销上，并将旋转盘上的锁母旋紧。检查旋转盘是否腐蚀或损伤，如有腐蚀或损伤应与厂家更换
实验室有毒常用药品0.溴化乙锭（EB）：大家都比较熟悉了。具有强诱变致癌性，使用时一定要戴一次性手套，注意操作规范，不要随便触摸别的物品。1.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操作时戴合适的手套
实验室有毒常用药品0.溴化乙锭（EB）：大家都比较熟悉了。具有强诱变致癌性，使用时一定要戴一次性手套，注意操作规范，不要随便触摸别的物品。1.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操作时戴合适的手套
质粒的制备可以用于（1）携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体，它在基因操作中具有重要作用；（2）质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。实验方法原理在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开，而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调
1. 细胞富集/选择 激光捕获纤维切割、FRCS分型、磁珠捕获可用于从组织或者标本中获得相同类型的细胞，提高分子检测的灵敏度和特异性。这些方法通常用于检测循环肿瘤细胞，以监测最小剩余疾病（MRD）777盛世国际官网，或者检测母体血液中胎儿细胞。肿瘤细胞可采用特定的表面标志物从混合细胞中分离。细胞富集方法可通过以下方式
